现代中西医结合杂志

2022, v.31(09) 1204-1211+1217

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黄芩苷对挤压综合征大鼠急性肾损伤的保护作用机制研究
Study on the mechanism of protective effect of baicalin on acute kidney injury in rats with crush syndrome

邢兆国;王彦志;贾东昭;李琦军;

摘要(Abstract):

目的 基于肌肉线粒体功能障碍探讨黄芩苷对挤压综合征大鼠急性肾损伤的保护作用。方法 将健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、生理盐水组、生理盐水+黄芩苷组,每组30只。假手术组麻醉后不做任何处理;其余组大鼠双侧后肢用橡皮止血带压迫5 h制成挤压综合征模型,然后立即分别进行1,3,6,24 h再灌注,进行大量液体复苏,生理盐水+黄芩苷组同时给予黄芩苷20 mg/kg静滴。记录各组大鼠再灌注后0,1,3,6,24 h平均动脉压,检测血钾(K+)、肌酸磷酸激酶(CPK)、血细胞比容(Hct)及血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,测定尿液和血液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平和尿液中肾损伤因子-1(KIM-1)水平,测定损伤肌肉(腓肠肌)组织中亚硝酸盐(NO+)、肌酸磷酸激酶(CPK)、血细胞比容(Hct)及血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,测定尿液和血液中N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)水平和尿液中肾损伤因子-1(KIM-1)水平,测定损伤肌肉(腓肠肌)组织中亚硝酸盐(NO(2-))、硝酸盐(NO(2-))、硝酸盐(NO(3-))、硫代巴比妥酸反应产物(TBARS)含量及髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,同时测量各时间点血液中的MPO活性;使用JC-1线粒体膜电位分析试剂盒评估线粒体膜电位;使用Quantikine(3-))、硫代巴比妥酸反应产物(TBARS)含量及髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,同时测量各时间点血液中的MPO活性;使用JC-1线粒体膜电位分析试剂盒评估线粒体膜电位;使用Quantikine?cyt c免疫分析法测量损伤肌肉细胞质中细胞色素C(Cyt C)含量;Western blot法检测各组大鼠肌肉组织中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、p-eNOS、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、血红素氧化酶(HO)-1的表达情况。结果 模型组大鼠再灌注1,3,6,24 h的MAP均明显低于假手术组(P均<0.05),血清K?cyt c免疫分析法测量损伤肌肉细胞质中细胞色素C(Cyt C)含量;Western blot法检测各组大鼠肌肉组织中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、p-eNOS、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、血红素氧化酶(HO)-1的表达情况。结果 模型组大鼠再灌注1,3,6,24 h的MAP均明显低于假手术组(P均<0.05),血清K+、CPK、Hct、IL-1β、TNF-α水平均明显高于假手术组(P均<0.05)。生理盐水组和生理盐水+黄芩苷组再灌注1,3,6,24 h的MAP均明显高于模型组(P均<0.05),血清K+、CPK、Hct、IL-1β、TNF-α水平均明显高于假手术组(P均<0.05)。生理盐水组和生理盐水+黄芩苷组再灌注1,3,6,24 h的MAP均明显高于模型组(P均<0.05),血清K+、CPK、Hct、IL-1β、TNF-α水平均明显低于模型组(P均<0.05),且生理盐水+黄芩苷组再灌注6 h血清K+、CPK、Hct、IL-1β、TNF-α水平均明显低于模型组(P均<0.05),且生理盐水+黄芩苷组再灌注6 h血清K+和再灌注3,6 h CPK水平均明显低于生理盐水组(P均<0.05)。模型组再灌注24 h尿液中NAG水平、KIM-1/Cr及再灌注6 h、24 h血浆中NAG水平均明显高于假手术组(P均<0.05);生理盐水组、生理盐水+黄芩苷组再灌注24 h尿液中NAG水平和生理盐水+黄芩苷组血浆中NAG水平、KIM-1/Cr均明显低于模型组(P均<0.05)。再灌注0,1,3 h,模型组损伤肌肉组织中NO+和再灌注3,6 h CPK水平均明显低于生理盐水组(P均<0.05)。模型组再灌注24 h尿液中NAG水平、KIM-1/Cr及再灌注6 h、24 h血浆中NAG水平均明显高于假手术组(P均<0.05);生理盐水组、生理盐水+黄芩苷组再灌注24 h尿液中NAG水平和生理盐水+黄芩苷组血浆中NAG水平、KIM-1/Cr均明显低于模型组(P均<0.05)。再灌注0,1,3 h,模型组损伤肌肉组织中NO(2-)和NO(2-)和NO(3-)含量均明显低于假手术组(P均<0.05),而再灌注24 h均明显高于假手术组(P均<0.05);生理盐水+黄芩苷组再灌注6,24 h损伤肌肉组织中NO_2(3-)含量均明显低于假手术组(P均<0.05),而再灌注24 h均明显高于假手术组(P均<0.05);生理盐水+黄芩苷组再灌注6,24 h损伤肌肉组织中NO_2-和NO_3-和NO_3-含量均明显低于模型组(P均<0.05),且再灌注24 h NO_3-含量均明显低于模型组(P均<0.05),且再灌注24 h NO_3-含量明显低于生理盐水组(P<0.05)。模型组再灌注6,24 h损伤肌肉组织中MPO活性和再灌注3,6,24 h血液中MPO活性均明显高于假手术组(P均<0.05),生理盐水+黄芩苷组均明显低于模型组(P均<0.05)。再灌注3,6 h,模型组损伤肌肉组织中SOD活性明显低于假手术组(P均<0.05),TBARS水平明显高于假手术组(P均<0.05);生理盐水+黄芩苷组SOD活性明显高于模型组(P<0.05),TBARS水平明显低于模型组(P<0.05)。再灌注1,3,6,24 h,模型组JC-1荧光强度均明显低于假手术组(P均<0.05),细胞质中Cyt C含量均明显高于假手术组(P均<0.05);生理盐水+黄芩苷组JC-1荧光强度均明显高于模型组(P均<0.05),细胞质中Cyt C含量均明显低于模型组(P均<0.05)。再灌注1,3 h,生理盐水+黄芩苷组损伤肌肉组织中p-eNOS/eNOS表达量均明显高于模型组(P均<0.05);模型组再灌注24 h损伤肌肉组织中p-eNOS/eNOS表达量和再灌注6,24 h的iNOS、HO-1相对表达量均明显高于假手术组(P均<0.05),生理盐水+黄芩苷组均明显低于模型组(P均<0.05),生理盐水组与模型组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 黄芩苷对挤压综合征大鼠急性肾损伤有明显保护作用,机制可能与黄芩苷可改善线粒体功能障碍,抑制炎症反应有关。

关键词(KeyWords): 挤压综合征;急性肾损伤;黄芩苷;一氧化氮;炎症反应;线粒体功能障碍

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 河北省医学科学研究重点课题计划项目(20181052)

作者(Authors): 邢兆国;王彦志;贾东昭;李琦军;

参考文献(References):

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